白芷为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.或杭白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)ShanetYuan的面法干燥根。白芷中含有香豆素类、优化油提艺及氧化研究挥发油、白芷多糖类、挥发活性黄酮类等多种有效成分,取工其抗具有解表散寒、面法祛风止痛、优化油提艺及氧化研究宣通鼻窍、白芷燥湿止带、挥发活性消肿排脓的取工其抗功效。现代研究表明,面法其具有抑制黑色素、优化油提艺及氧化研究抗氧化、白芷镇痛、挥发活性抗炎、取工其抗抗过敏等药理作用,在临床应用广泛。白芷具有抑制黑色素的作用和抗氧化作用,可作为美白化妆品的原料。由于白芷无毒且香气浓郁,也常作为肉类制作的调味品,可除去牛羊肉的膻味。挥发油作为白芷的有效成分之一,是其作为药品和调味品的重要活性成分。
提取挥发油的一般方法有压榨法、溶剂提取法、水蒸气蒸馏法和超临界CO2萃取法等。考虑到药品和食品的安全性和操作的可行性,在前期研究的基础上,白芷挥发油的提取选用水蒸气蒸馏法,该法操作简便、溶剂安全易得,并采用Box-Behnken设计响应面法优选白芷挥发油的提取工艺,克服了正交试验精度不够的缺点。同时,通过体外抗氧化试验测定白芷挥发油对羟自由基清除率和DPPH自由基清除率,考察其体外抗氧化能力,为白芷产品的综合开发提供参考依据。
白芷(购于北京同仁堂药店),其产地为四川,经鉴定为白芷为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f的干燥根。其质量标准均符合《中国药典》(2020版)的各项规定。抗坏血酸标准品(天津市科密欧化学试剂有限公司),DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,AR,合肥巴斯夫生物科技有限公司),无水乙醇,无水硫酸钠,硫酸亚铁,水杨酸,过氧化氢均为分析纯,实验用水为实验室自制蒸馏水。
FA20413分析天平(上海精密科学仪器有限公司),WF111710-849万能粉碎机(江阴市万通药化机械设备有限公司),JB挥发油测定仪(常州普天仪器制造有限公司),T6型紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
取干燥后经粉碎成一定粒度的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,加入一定量蒸馏水,浸泡一定时间,采用水蒸气蒸馏法提取白芷挥发油,参照2020版《中国药典》(四部2240挥发油测定法)测定挥发油的体积,记录出油量,经无水硫酸钠干燥后,置于具塞瓶中称重。依据公式计算得油率,得油率(%)=(M1-M2)/M0×100%。其中M1为挥发油和具塞瓶的总质量,M2为具塞瓶的质量,M0为药材粉末质量。
水蒸气蒸馏法提取挥发油的影响因素主要有液料比、浸泡时间、提取时间和粉碎粒度。本实验选取以上4个因素作为单因素试验的考察因素。
液料比A确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,浸泡时间为2h、提取时间为3h,考察不同液料比5∶1mL/g、10∶1mL/g、15∶1mL/g、20∶1mL/g、25∶1mL/g对白芷挥发油得率的影响。
浸泡时间B确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,提取时间为3h,考察不同浸泡时间0h、1h、2h、3h、4h对白芷挥发油得率的影响。
提取时间C确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,浸泡时间为2h,考察不同提取时间2h、3h、4h、5h、6h对白芷挥发油得率的影响。
粉碎粒度D确定:精密称取分别过10目、24目、50目、65目、80目筛的白芷粗粉50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,浸泡时间为2h,提取时间为3h,考察不同粉碎粒度对白芷挥发油得率的影响。
在单因素试验的基础上,进一步采用BoxBehnken模型设计试验,以液料比(A)、浸泡时间(B)、提取时间(C)、粉碎粒度(D)四个影响因素为自变量,以白芷挥发油得率为响应值Y,进行响应面分析,确定最佳提取工艺条件
BoxBehnken试验因素与水平见表1。
参考马延红等测定挥发油抗氧化活性的方法,并略作改动。取不同量的白芷挥发油至于50mL的容量瓶中。用无水乙醇将样品配制成0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL不同浓度的白芷挥发油样品溶液,分别取2.0mL上述样品溶液和2.0mL浓度为0.1mmol/mL的DPPH溶液置于具塞比色管中,混合均匀后放于避光处静置30min后,用紫外分光光度法在波长517nm处测定其吸光度,重复测定三次,取平均值,记为A1;用相同体积的无水乙醇分别代替DPPH溶液和白芷挥发油样品溶液,在相同条件下测定吸光度,分别记为A2和A0。按照公式计算清除率,并以和样品同浓度的抗坏血酸(Vc)对照品溶液作为阳性对照。清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100%。
参考罗秋水等清除羟自由基的方法,略有改动。取6支试管,依次加入2.0mL的6mmol/LFeSO4溶液,分别加入浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL的白芷挥发油无水乙醇溶液1.0mL和2.0mL的6mmol/LH2O2溶液,充分振摇后,静置10min,再依次加入2.0mL的6mmol/L的水杨酸乙醇溶液,待混合均匀后,在50℃的水浴中反应30min,并置于波长517nm处测得不同浓度下的白芷挥发油溶液吸光度,平行测定三次,取平均值记为Aa,用1.0mL的无水乙醇代替样品溶液测得空白对照液吸光度A0,用1.0mL无水乙醇代替样品溶液不加显色剂H2O2测得底物的吸光度Ab。按公式计算羟自由基清除率,清除率=[1-(Aa-Ab)/A0]×100%。以和样品同浓度的抗坏血酸(Vc)对照品溶液作为阳性对照。
相关链接:硫酸亚铁,水杨酸,过氧化氢,无水硫酸钠
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曼联也开了续约合同高通、AMD寻求将部分芯片生产转单三星电子,降低对台积电依赖商汤科技:美国打压遏制中国硬科技发展 强烈反对相关指控改名为Meta的这一年 Facebook已痛失18位高管穆帅钦点拜仁大将冬季加盟 球员愿意离开投奔他观点:索帅弃用曼联此人是正确的 他就是水货火箭听取伍德报价 薪资专家:交易价值处于峰值冲刺IPO未果 妈妈网超范围收集个人信息 涉及身份证号等市场对omicron担忧消退,美油创三个多月来最大单周涨幅总监:梅西加盟后一周内 巴黎长了近2000万粉打破新规?哈登罚球命中数联盟第一!阿杜和阿德明天双双复出 刚轮休一场惨遭爆冷降级的大厂年终奖:去年手机,今年文化衫加自热火锅詹俊:巴萨和顶级队差太远 球迷很庆幸梅西去巴黎邱泽许玮甯宣布结婚 两人曾主演《当男人恋爱时》互联网大厂纷纷精简人员?转型路碰上裁员潮互联网未来该咋看?继LG电子、现代汽车后,三星电子也将加速机器人技术商业化进程废旧动力电池回收百亿蓝海 看资本如何跑步进场这对弄不好要结婚?商汤科技:美国打压遏制中国硬科技发展 强烈反对相关指控名嘴:若篮网仍想夺冠 欧文最迟得在下月归来字母哥41+17率雄鹿逆转 三人20+火箭功亏一篑对比大!乔哈受伤前后 篮网这数据从第1到倒数广州队高层表态未来补发薪水 盼大家全力以赴踢球柔宇科技:至暗时刻 路在何方?朗尼克想为曼联买一名后腰 3大目标已曝光朗尼克想为曼联买一名后腰 3大目标已曝光12月13日外汇交易提醒:通胀数据削弱美联储加息预期,关注下周各大央行决议900亿的赛道崛起!盒马消费报告:可生食鸡蛋大都不是“生”吃英超-C罗造点+绝杀 德赫亚屡救险 曼联力夺3连胜谷歌员工年薪曝光:硬件工程师26万美元、软件工程师30万高通、AMD寻求将部分芯片生产转单三星电子,降低对台积电依赖原油周评:Omicron怕是纸老虎,油价周线终结六连跌!金元足球都赖恒大? 看看最贵10大外援的性价比被老教授告了的知网:年入12亿,用几百元阅读卡发稿费米勒:库里是史上第一射手 在场上他无所不能贝索斯前妻打破常规:未公布最新慈善捐款对象,此前已捐86亿美元谷歌员工年薪曝光:硬件工程师26万美元、软件工程师30万改名为Meta的这一年 Facebook已痛失18位高管李祝用“接棒”任中诚信托董事长,“人保系”掌舵将带来怎样的业务转型?湖人19记三分球创纪录 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